（一）材料 新鲜牛奶 （一）试剂 1、95%乙醇 1 200mL 2、无水乙醚 1 200mL 3、0。2mol/L pH4。7醋酸——醋酸钠缓冲液 300ml 先配A液与B液 A液：0。2mol/L醋酸钠溶液 称NaAC·3H2O 54。
44g，定容至2000ml。 B液：0。2mol/L醋酸溶液，称优级纯醋酸（含量大于99。8%）12。0g定容至1000ml。 取A液1770ml，B液1230ml混合即得Ph4。7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。 4、乙醇——乙醚混合液 乙醇：乙醚=1 ：1（V/V） （二）器具 1、离心机 2、抽滤装置 3、精密pH试纸或酸度计 4、 电炉 5、烧杯 6、温度计 四、操作步骤 （一）酪蛋白的粗提 100mL牛奶加热至40℃。
在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4。7的醋酸缓冲液100mL。用精密pH试纸或酸度计调pH至4。7。 将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟（3000 r /min）。弃去清液，得酪蛋白粗制品。 （二）酪蛋白的纯化 1、用水洗涤沉淀 3次，离心10分钟（3 000r/min），弃去上清液。
2、在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。 3、将沉淀摊开在表面 上，风干；得酪蛋白纯品。 （三）准确称重，计算含量和得率。 含量：酪蛋白g/100 mL牛乳（g%） 式中理论含量为3。
5g/100mL牛乳。
http://sky。scnu。edu。cn/jingpin/swhx/shiyanzhidao/5。doc实验5 酪蛋白的制备 一、目的1、学习从牛奶中制备酪蛋白的原理和方法。2、掌握等电点沉淀法提取蛋白质的方法。 二、原理牛乳中的主要的蛋白质是酪蛋白，含量约为35g/L。
酪蛋白是一些含磷蛋白质的混合物，等电点为4。7。利用等电点时溶解度最低的原理，将牛乳的pH调至4。7时，酪蛋白就沉淀出来。用乙醇洗涤沉淀物，除去脂类杂质后便可得到纯酪蛋白。 三、材料、试剂与器具（一）材料 新鲜牛奶（一）试剂1、95%乙醇 1 200mL2、无水乙醚 1 200mL3、0。
2mol/L pH4。7醋酸——醋酸钠缓冲液 300ml 先配A液与B液A液：0。2mol/L醋酸钠溶液 称NaAC·3H2O 54。44g，定容至2000ml。B液：0。2mol/L醋酸溶液，称优级纯醋酸（含量大于99。
8%）12。0g定容至1000ml。取A液1770ml，B液1230ml混合即得Ph4。7的醋酸——醋酸钠缓冲液3000ml。4、乙醇——乙醚混合液 乙醇：乙醚=1 ：1（V/V）（二）器具1、离心机 2、抽滤装置3、精密pH试纸或酸度计 4、 电炉5、烧杯 6、温度计 四、操作步骤（一）酪蛋白的粗提100mL牛奶加热至40℃。
在搅拌下慢慢加入预热至40℃、pH4。7的醋酸缓冲液100mL。用精密pH试纸或酸度计调pH至4。7。将上述悬浮液冷却至室温。离心15分钟（3000 r /min）。弃去清液，得酪蛋白粗制品。（二）酪蛋白的纯化1、用水洗涤沉淀 3次，离心10分钟（3 000r/min），弃去上清液。
2、在沉淀中加入30mL乙醇，搅拌片刻，将全部悬浊液转移至布氏漏斗中抽滤。用乙醇—乙醚混合液洗沉淀2次。最后用乙醚洗沉淀2次，抽干。3、将沉淀摊开在表面 上，风干；得酪蛋白纯品。（三）准确称重，计算含量和得率。含量：酪蛋白g/100 mL牛乳（g%） 式中理论含量为3。
5g/100mL牛乳。
答：经过这个次序以后，结晶吸附的溶剂改为乙醚，乙醚沸点低，容易挥散干净，得到纯的结晶。乙醇和乙醚的溶解性能产很远，乙醇实际上介于水和有机溶剂之间，而乙醚是完全的有机...详情>>
