比色分析应用示例——铁的含量测定　
　一、原理　　应用比色分析测定溶液中伯的含量有硫氰酸盐显色法、磺基水杨酸法及邻菲罗啉显色法等各各种方法。现以磺基水杨酸法为例介绍铁的含量测定。　　在不同酸度下，Fe3+和磺基水杨酸生成组成不同的配合物。若控制溶液PH值在8-11。
  5的条件下显色，可生成配位数为6的黄色三磺基水杨酸合铁配合物。反应式如： 上式可简写为 溶液的最大吸收波长λmax=420nm，因此可在420nm 处进行测定（若用光电比色计测定可选择蓝色光片）。此方法适合于测定无大量Cu2+、Ca2+、Cr3+、Ni2+等离子存在的溶液中铁离子的含量。
   　　二、操作步骤　　（一）标准曲线的绘制　　称取一定量硫酸铁铵[NH4Fe(SO4)2·12H2O]用蒸馏水溶解，加适量配制成含 Fe3+0。1lg·L-1的标准溶液，再稀释成含Fe3+0。025mg·L-1的操作溶液。　　取25ml容量瓶6只，编号后分别加入操作溶液0。
  00，1。00，2。00，3。00，4。00及5。00ml，各加入10%NH4CL溶液2ml和10%磺基水杨酸溶液2ml，滴加氨水至溶液由紫红色变为黄色，并使氨水稍过量，然后用NH4CL-NH3缓冲溶液稀释至刻度,摇匀,以1号为空白,在420nm处依次测定吸光度。
  以Fe3+含量为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。(二)样品的测定取25ml容量瓶1只,准确加入经过处理的浓度在标准范围内的被测溶液,按上面标准系列配制的同样加入等量的显色剂和缓冲溶液,在相同条件下测定被测溶液的吸光试,利用标准曲线找出样品溶液的浓度,根据样品溶液的稀释倍数,求出样品的含量。
  例如,用磺基水劣根性酸法比色测定微量铁含量。称取0。432g硫酸铁铵溶于水,加18%硫酸溶液1ml,转移至500ml容量瓶中,用水定容,作为标准溶液,其浓度为0。1g·L-1。取下列不同体积的上述溶液于50ml容量瓶中,加入显色剂后定容,在420nm处测定吸光度,结果如下:溶液体积/ml 。
  005。00吸光度A	0。097	0。200	0。304	0。408	0。510
c/(g·L-1)×1 。0010。00　　以吸光度A值为纵坐标，标准溶液中Fe3+含量为纵坐标作图，即得如图8-12的标准曲线。　　吸取待测液样品5。00ml于50ml容量瓶中，加入显色剂后定容，其方法与绘制标准曲线相同，测得吸光度为0。
  341。由标准曲线查得A为0。341时，c为6。60×10-3g·L-1。故样品溶液中铁离子的浓度为c=6。60×10-3×50。00×1/5。00=6。6×10-2(g·L-1) 图8-12　磺基水杨酸法测定铁的标准曲线 
铁的含量测定　
邻菲罗啉显色法
(1) 邻菲罗啉分光光度法测定溶液中的二价铁离子。
  
① 硫酸亚铁铵标准溶液的配制：
 准确称取优级纯硫酸亚铁铵0。7020g于烧杯中，加水50ml和浓硫酸20ml，溶解后转移入1000ml容量瓶中,用水稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含铁离子0。100mg。
②　测定步骤
第一、绘制标准曲线：用水将铁标准溶液稀释10倍，得到浓度为0。
  0100mg/ml的标准溶液。取此溶液0。00、0。50、1。00、1。50、2。00、3。00、分别置于6只50ml容量瓶中，各加2mol/l盐酸溶液5ml和10%0盐酸羟胺1ml，用水稀释至约40ml，混匀。2min后加邻菲罗啉2ml、醋酸铵缓冲溶液5ml，加水至刻度，摇匀。
  用3cm比色皿在分光光度计510nm处，以一号溶液为参比，测定各溶液的吸光度。以吸光度为纵坐标、铁的毫克数为横坐标绘制标准曲线。实验数据图表如下：
表3-5 标准曲线的吸光度
编号	1	2	3	4	5	6
铁的含量（×104mg/ml）	0	1	2	3	4	6
吸光度	0	0。
  042	0。084	0。125	0。165	0。235
第二、亚铁离子含量的测定：用水将浸取液稀释100倍，吸取稀释液1ml于50ml容量瓶中，加2mol/l盐酸溶液5ml，用水稀释至约40ml，加邻菲罗啉2ml和醋酸铵缓冲溶液5ml，稀释至刻度，摇匀。
  测定其吸光度。所得数据带入图3-3中的方程即可求出铁的含量，在乘以5000即为原浸取液中二价铁离子的含量。
 
                图3-3邻菲罗啉分光光度法的标准曲线图 
第三、总铁含量的测定：
用水将浸取液稀释100倍，吸取稀释液1ml于50ml容量瓶中，加2mol/l盐酸溶液5ml，加入盐酸羟胺少量10%2ml，煮沸，冷却后，加邻菲罗啉2ml和醋酸铵缓冲溶液5ml，稀释至刻度，摇匀。
  测定其吸光度。即可求出总铁的含量，
总铁的含量减去亚铁离子的含量就是三价铁的含量了。
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