只要用无氮的培养基就可以筛选自生固氮菌。 因为固氮菌特点就是利用的空气当中的氮气作为氮源物质，所以无需在培养基中添加氮元素，其他微生物不能生长，而只有固氮菌才能生存。 希望帮到你。 分离厌氧菌要考虑到氧气的影响，尽量使细菌与氧气隔离开。所以琼脂振荡法比较好。它是在含熔化的琼脂试管中混合不同稀释浓度的培养物，使产生的菌落埋在琼脂中而不是在平板的表面，这就有效隔离了空气。纯化也可以在含有液体培养基的试管中连续稀释细胞悬浮也，达到最适浓度，不过也要注意隔绝空气。◎ 谢谢。。。。。。。。。
一、实验名称：临时装片、切片、涂片的制作、观察和指导。二、实验目标：让学生通过独立自主的制作临时装片、切片、涂片的方法来感知细胞的形态和结构，从而使学生对细胞达到一定的认识，为以后的教学作下铺垫。制作临时装片的成功，对提高学生的生物学兴趣和生物科学素养都起着重要的作用。
同时，这样锻炼了学生的动手能力，也培养了学生的自己动脑思考的能力。三、实验方法及步骤：（一）实验材料：显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、毛笔、滴管、擦镜纸；清水、碘酒溶液；西红柿、空心莲子草、洋葱；创可贴（切片时可能会有人受伤）。
（二）实验步骤：1、临时装片的制作。⑴准备。擦用擦镜纸把载玻片和盖玻片擦拭干净。改进：将洁净的纱布改为擦镜纸，擦拭玻片时要注意用左手的拇指和食指夹住玻片的两端，右手的拇指和食指衬垫上洁净的纱布后，夹在玻片两面，同时擦拭，以防将玻片损坏，滴用滴管在载玻片中央滴1-2滴清水。
改进：在制片时至少滴2滴清水，这样加盖玻片时，盖玻片下的空间中水较充盈，气泡就少，细胞的活性也较好取用刀片在洋葱表面上划“井”字（大约0。5cm2)，用镊子撕取外表皮。问题：由于叶表皮皱缩、学生不熟练等，导致撕下的表皮薄膜过厚，在显微镜视野中难以找到理想的观察对象，致使实验效果较差。
改进：首先将洋葱鳞片叶切成宽1。0-1。5cm的纵向窄条，再用刀片将洋葱鳞片叶内侧表皮划成小块（切忌划透），然后用镊子夹住所划表皮的边缘，将其轻轻取下（洋葱鳞片叶内侧表皮易与叶肉分离，操作简便）即可。这一改进降低了实验操作难度，提高了制片质量。
放把撕取的表皮浸入载玻片上的水滴中，并展平。⑵盖盖玻片。盖用镊子夹起盖玻片，使它的一边先接触载玻片上的水滴，然后缓缓地放下，盖在要观察的材料上。⑶染色。染：将玻片倾斜10度左右，从高的一侧滴入碘液，让其自己流入玻片。问题：染色时书中要求是把1-2滴碘液滴在盖玻片的一侧，然后用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，使染液浸润标本的全部。
然而，部分同学可能将盖玻片下所有水全部吸干，做出的装片会有很多的大气泡，且气泡将细胞掩盖了，或者有人将气泡误认为细胞。改进：染色时不用吸水纸吸水，而是将玻片倾斜10度左右，这个角度一定不能太大，太大水就会流出盖玻片下的小空间，然后从较高一侧的盖玻片与载玻片的缝隙往里滴碘液，让碘液自己流进盖玻片下，如果有液体流到盖玻片外，用吸水纸擦拭，但一定要强调不能从盖玻片边缘吸水，盖玻片周围一定要有充盈的液体，这样才不会出现大气泡。
⑷镜检。用显微镜观察。2、临时切片的制作。⑴选材。选择软硬适度的材料，先截成适当长度，一般以20-30mm为宜（便于手持即可），材料太软，可用马铃薯块茎、胡萝卜根或肥皂将欲切取的材料夹住一起进行切片，本实验用空心莲子草，可直接用于切片。⑵切片。
用三只手指夹住空心莲子草，（使其高于手指，右手持刀片（刀片用水润湿），将空心莲子草削去一层，形成平面，刀口向内，与断面平行，以均匀的动作，自左前方向右后方快速拉刀，滑行切片（注意要整个臂部用力，而不要腕部用力。）。⑶镜检。如此连续动作，切下一些薄片，然后用毛笔将最薄的几片材料移至滴有一滴清水的洁净的载玻片中央，盖上盖玻片，用显微镜观察。
3、临时涂片的制作。⑴把成熟的番茄果肉放在培养皿内，让汁液流出（汁液中有均匀的离散细胞。）。⑵吸取汁液，滴在洁净的载玻片上，将涂抹的液滴滴于载玻片的中央或偏右约1/4处，左手持载玻片或放在平台上，右手持另一载玻片作推片。先慢慢向右移动，让短边接触溶液，两载玻片的夹角约为30-45度，再向左迅速推载玻片，即可涂成一均匀的薄片。
（也可用解剖针、牙签、火柴杆等涂成薄片，盖上盖玻片即可。）四、预期结果：1、成功观察到了洋葱表皮细胞、西红柿果肉细胞及空心莲子草茎的结构。2、通过使用显微镜对细胞的观察，同学们对显微镜的使用有进一步的了解和认识。3、通过学生们对临时装片、切片、涂片独立自主的制作，使得大家基本掌握制作临时装片、切片、涂片的方法。
4、通过对细胞结构的观察，使同学们对于细胞的形态和结构有更进一步的了解。
答：取土壤稀释液，用无氮培养基，在无氧的环境下培养详情>>
