PCR产物条浓度太低,如何提高?
标准阳性条带也很弱
引物是新合成的(此引物以前做过很多次,没问题)
PCR仪别人用的很好
PCR体系也换了全新的
电泳也没问题
模板为目的基因极少,杂基因极多(99%以上,无法分离,可以跑出条带)
DNA 提取OK
条但依然很暗
问题在哪里?
请高手指教
如果特异性很好,可以优化反应条件,比如增加模板浓度,降低退火温度,增加循环数等。
其实,如果只是为了回收产物,也可以多扩增几管,合并。
答:应该是单位时间内产物浓度增加量或底物浓度减少量与酶活性成正比,为线形关系。详情>>