蛋白质复性是什么?
蛋白质复性是什么?其过程是什么?
换个角度从物理学方面看,“冰”是一种单矿岩,其生成过程中会自动排除其中的杂质。这也就是为何海上的冰山都是淡水的缘故。通常人们用于溶解包涵体肽链的液体是高浓度的变性盐(一般是8M的尿素,或者6M的盐酸胍,两种盐的密度都在1.3左右),而这种溶质的溶解度受温度影响很大。随着温度的降低,会发生饱和、过饱和、结晶析出现象。溶质结晶析出自然也就意味着溶液浓度的下降,进而使变性能力的下降。下降到一定程度时,肽链其内在的塌缩的趋势逐渐占据优势,引导肽链进行自行复性至其活性状态,即能级最低状态。也就是说,肽链折叠的动力是由肽链的一级结构(氨基酸序列)决定的,人类直到目前所能做的复性过程其实质不过就是提供了一个变性能力和缓下降的变性体系(由尿素或者盐酸胍的浓度下降来实现)。在这个过程中最需要防止的就是肽链之间的错误折叠(链间形成次级键),这会产生“雪崩样”的效果,导致大量多聚体沉淀(密度也是1.3左右)。
答:重组蛋白在大肠杆菌(E. coli)高效表达时,往往以不溶的、无活性的蛋白聚集体,即包涵体(inclusion body)的形式存在于细胞内。必须从细胞内分离出...详情>>