PCR反应模板核酸的提取制备方法是什么?
PCR反应模板核酸的提取制备方法是什么?
异硫氰酸胍提取编辑异硫氰酸胍法提取制备模板核酸此法主要用于RNA的提取.标本为组织细胞及血清等.1.异硫氰酸胍消化液异硫氰酸胍4mol/L柠檬酸钠(PH7.0)25mmol/L十二烷基肌酸钠0.5%β巯基乙醇0.1mol/L2.消化方法:用50~100ul细胞悬液及血清,加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后,或65℃1小时,或室温放置数分钟,然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的醋酸钠缓冲液,再加等体积的酚:氯仿,用力振摇约10s,10000r/min,离心5min,取上清加等体积异丙醇20℃放置3h后,14000r/min离心15min,沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1~2次,真空干燥,沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增,或放20℃保存
答:没有什么影响的。详情>>