PCR克隆基因
想拿到一个基因的CD区，CD区一共1400bp，用引物A（上游引物）,B（下游引物）扩出了1-1200bp前面一段，引物C（上游引物）,D（下游引物）扩出了1000-1400bp后面一段，可是用A和D做引物PCR什么条带都没有，甚至连引物二聚体都没有...用primer5分析这对引物虽然得分不高，但也还算可以，毕竟这两个引物和别的引物一对的话还是能扩出来的...请大家帮忙分析一下原因，是否还有必要继续摸索条件用这对引物继续扩完整CD区...跪谢...TT
答：一般来说，引物和模板都是DNA，在-20摄氏度下不会有问题。再说，引物设计的时候一般是不会有相互配对或自配的情况，所以形成二聚体或回文结构的可能性不大。你可以把...详情>>
