全部答案

2019-01-15 17:56:46

•   1。无菌材料的获得　　选取一年生幼苗生长健；仕无病虫害的母株，切取当年萌发之春梢先端，去除叶片，保留叶柄，将枝条截成2—3cm的小段。消毒时先用10%洗衣粉溶液浸泡15min，然后用流水；中洗30min。在无菌条件下用75%乙醇溶液浸泡杀菌30 S， 用0。
    1%的升汞溶液加吐温—20杀菌3、5、10、15min。0。1%升汞溶液灭菌效果随杀菌时间延长而提高，杀菌时间少于10min则无菌苗获得率小于13。5%，杀菌15min无菌苗获得率为23。7%，外植体死亡率达33。3%。随着杀菌时间的延长升汞对植物材料的毒害作用加剧，以0。
    1%升汞溶液杀菌时间10—15min为宜。用无菌水；中洗3—5遍后，接种到MS固体培养基上。2。芽的诱导　　将接种后20d的无菌苗转移至培养基（1）上，5—7d茎尖开始萌动，10d腋芽萌动，芽逐渐长大，继续培养20d，茎段上所有腋芽均萌发成侧枝。
    侧枝生长正常，叶片深绿色，茎基部愈伤组织较少，黄绿色。　　
  3。试管苗的增殖 　　将试管苗侧枝分割成2—3芽为一段，接种于培养基（2）上。10d后茎段叶芽萌动，30d长成大量侧枝，并有大量双生枝和三生枝产生。接种茎段形成具有5—8侧枝的丛生苗，平均增殖5。
    8倍。试管苗节间明显伸长，幼嫩叶片茎杆均呈淡红色，叶片大，茎杆较粗，组织不充实，茎基部愈伤组织大。以后每30d继代1次，经3—4次继代试管苗出现玻璃化现象。　　
  4。壮苗培养　　将经增殖培养的试管苗每继代3—4次后转移至培养基（3）上。40d后形成大量侧枝，平均每茎段4—6侧枝，侧枝平均长1。
    8cm，平均增殖3。1倍。基本无双生枝或三生枝。侧枝生长健；D，组织充实，叶色深绿，基部愈伤组织小，黄绿色，无玻璃化现象。　　
  5。根的诱导　　将生长健壮、长度大于1。2cm的侧枝分割，转移至培养基（4）上。提高光照度至2500—3000lx，延长光照时间至每天16h。
    培养15d后开始有根原基形成，根原基形成后即可炼苗。20—25d调查生根情况，生根率73%，每苗平均生根l—2条。　　
  6。炼苗移栽　　将生根试管苗带瓶移人栽培温室，培养1周。当根长0。5—1 omb寸，打开瓶盖炼苗3—5d，将生根苗取出，洗净根部培养基，栽植于育苗穴盘中。
    以黑泥碳为基质，温度控制在20—25℃之间，湿度为85%—95%左右，20d即可成活，成活率达73%以上。

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  毒***

  2019-01-15 17:56:46

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