如何制备细菌的粗提酶液？

挑取单个纯分菌落接种于2 ml
M-H肉汤中增菌18 ~24 h,吸取200 p (按
下一步增菌液量的0.4%计算）菌液到含有50 ml胰大豆蛋白胨水的增菌液中振荡增菌 4h，离心收集细菌，然后用0.01m0l/L的磷酸盐缓冲液（PH7.0)冲洗离获得的沉淀 制成一定浓度的细菌悬液，再用冻融法（-70℃室温或37℃水快速解 冻，反复5次）或超粉碎法（41，超声粉碎）破碎细菌细胞，使其菌体内的...

挑取单个纯分菌落接种于2 ml
M-H肉汤中增菌18 ~24 h,吸取200 p (按
下一步增菌液量的0.4%计算）菌液到含有50 ml胰大豆蛋白胨水的增菌液中振荡增菌 4h，离心收集细菌，然后用0.01m0l/L的磷酸盐缓冲液（PH7.0)冲洗离获得的沉淀 制成一定浓度的细菌悬液，再用冻融法（-70℃室温或37℃水快速解 冻，反复5次）或超粉碎法（41，超声粉碎）破碎细菌细胞，使其菌体内的酶释放出:: 来，离心收集液即为泽内酰胺酶的粗提取部分上清液接种于M-H平板常规培养， 证实无活菌存在再用头孢硝噻吩纸片确馨有泽内酰胺酶的存在。