用葡萄糖标准曲线怎么算多糖含?
用葡萄糖标准曲线怎么算多糖含量
葡萄糖标准曲线的制备:(1)葡萄糖标准液的制备:精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖标准品1g,溶解稀释后定容有于100ml容量瓶中,配成10mg/ml的标准贮备液,精密吸取贮备液1ml定容至100ml,配成0.1mg/ml的葡萄糖标准液。(2)葡萄糖标准曲线的制定:精密移取葡萄糖标准液0.0ul、0.2ul、0.4ul、0.6ul、0.8ul、1.0ul、1.2ul、1.4ul于25 ml具塞刻度试管中,加蒸馏水至2.0ml,再各加6%苯酚溶液1.5ml摇匀,迅速加入浓硫酸溶液5ml,振摇,放置10 min,置沸水浴中加热20min,取出冷却至室温,于490nm,以试剂空白为参比测定吸光值。
淀粉、纤维素的构成单位是葡萄糖,但植物多糖的话,种类就很多了,构成的单元也很多,多种单糖---果糖、半乳糖、木糖、甘露糖等等都可以作为构成单位。比如银耳多糖、香菇多糖,成分极为复杂。 苯酚硫酸法师利用糖在浓硫酸作用下,水解生成单糖,并迅速脱水生成糖醛衍生物,然后与苯酚缩合成橙黄色化合物。
在波长490 nm处和一定的浓度范围内,其吸光度与多糖含量呈线性关系正比,从而可以利用分光度计测定其吸光度,并利用标准曲线定量测定样品的多糖含量。 此时,对于杂聚多糖,只用葡萄糖溶液做标准曲线,是不准的。有时用多种单糖标准品作标准曲线,但不同单糖标准品在相同浓度下其吸收值相差较大(葡萄糖显色最大),分别制作标准曲线对杂多糖测定的结果也就不同。
因此,苯酚硫酸法对于成分复杂的多糖来说,只能是一个参考。 对杂多糖往往不用单一的苯酚硫酸法。比如,采用气相色谱法对杂多糖的组成进行分析,再配合苯酚硫酸法可以得到更可靠的结果,比单用苯酚硫酸法更可靠、准确。
答:与相近标准曲线的吸光度参比,计算出多糖的含量。吸光度与含量是正比例关系。详情>>
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答:对啊,你很有才华,我还投过你的赞扬票.详情>>
答:问题1:识时务者为俊杰。 问题2:将来。详情>>