初生代培养(1)外植体采集与消毒。①以茎尖为外植体。一般用5~6片叶的幼苗。先将苗的根 和叶片切除，用肥皂水冲刷，再用自来水反复冲洗。消毒处理： 用75%酒精将材料浸泡2秒钟，再用0。 15%升汞消毒20分钟， 用无菌水洗4~5次。在超净工作台上剥取生长点，使生长点部 分带有2~4枚叶原基，每个生长锥可切取2~4块带有分生能力 的外植体培养物，将其接种到培养基上。
  ②以叶片为外植体。取新鲜幼嫩心叶，用肥皂水洗刷后，用 自来水反复冲洗。消毒处理：用75%酒精将材料浸泡1 ~ 2秒钟， 再用0。1%升汞消毒15分钟，用无菌水洗4~5次。将叶片放置 于培养皿中，切取2cm为一块，将其接种到诱导培养基上。③以花梗为外植体。
  一般取靠近基部1~4节芽眼的花梗， 消毒操作方法同叶片，但使用升汞浓度为0。2%，消毒时间20分 钟，因为花梗比幼叶耐药性强，而且腋芽被芽苞包着，不易杀 伤。浓度高些，消毒时间长些，消毒效果更好些。消毒后将花梗 每节间切为一段，每段留有1个芽眼。
  (2)接种。茎尖接种将茎尖放在培养基上，轻轻往下稍压;叶片接种以切口一端轻插人培养基中，或平放于培养基上，并在 切口一端往下轻压。花梗接种按自然生长方向插入。(1)初生代培养基。茎尖、花梗为外植体的培养基：MS+ BA3mg/L+蔗糖3% +卡拉胶0。
  6% (PH值为5。 4);叶片为外 植体的培养基：MS+ K摄氏度0。 4mg/L+ NAA0。 2mg/L+ 蔗糖 1 % + 卡 拉胶0。6% (PH值为5。4)。蝴蝶兰在培养中，伤口部位常会分 泌出酚类化合物，造成培养物和培养基褐化，培养物坏死，要及 时将培养物更换到新的培养基上。
  茎尖培养经过20多天后，伤 口部位会长出愈伤组织并逐渐分生出原球体；以叶片为外植体的 经过一个多月后，叶片逐渐转黄，在伤口部位产生愈伤组织并逐 渐分化出原球体。蝴蝶兰株龄越小，叶片越幼嫩，越容易产生愈 伤组织，越容易分化出原球体。叶片以靠叶基部的一段较容易诱 导出原球体；花梗培养，接种后1个月可观察是否成活，成活的 花梗腋芽的苞片张开，可看到肿大的芽眼。
  在超净的工作台上把 花梗取出将芽眼切削下来，并在芽的基部轻切一刀，转人新的培 养基上。经过2天左右后会长出新芽。此外，将芽剥离出茎尖， 连同叶片培养，也可诱导出原球体。