分离培养无菌操作，取病死骡心血、肝、脾、肺和回肠病料，分别接种于以下两种培养基，37°C恒温培养24小时。结果:普通肉 汤和厌氧肉肝汤均呈均匀混浊。无菌操作，取培养物涂片，革兰染色，镜检发现无芽孢、无荚 膜、两端钝圆、菌体稍大和菌体短小、两极浓染的两种形态的革兰阴性菌。
  无菌操作，将培养物接种于两个葡萄血琼脂平皿，37°C:作 需氧和厌氧条件下纯培养，24小时后，两个平皿上均长出以下两种 形态的菌落：(1 )1号菌:为圆形、灰色、湿润、露珠样小菌落;涂片镜检为革兰 阴性、两极浓染的小杆菌。(2) 2号菌:为灰白色、圆形、湿润、半透明、中等大小的菌落；涂 片镜检为革兰阴性、两端钝圆、中等大小的杆菌。
  充菌操作，将两种菌落分别划线接种于SS琼脂平板上， 37°C恒温培养24小时，1号菌不生长，2号菌长出圆形、光滑、湿润、 边缘整齐、细小、无色透明菌落。2小鼠试验无菌操作，将9只健康小鼠分成3组：1组各皮下注射1号菌肉汤培养物0。 2毫升，2组各皮下注射2号菌肉汤培养 物0。
   2毫升，3组注射两种混合肉汤培养物0。 2毫升。结果:3个组 小鼠注射后。18〜30小时全部死亡，剖检死鼠发现肝、脾均肿大，盲 肠、回肠均充血、出血，肠壁变薄、透明；并从死鼠心血、肝和脾中均分离培养出注射菌。生化反应无菌操作，将两种分离菌进行常规生化反应， 结果如下：1号菌:能发酵葡萄糖和蔗糖，均产酸不产气，不发酵乳糖、 鼠李糖和山梨醇;靛基质试验阳性，R和V - P试验均呈阴性。
  2号菌:能发酵葡萄糖、鼠李糖和山梨醇，产酸又产气，不发 酵蔗糖和乳糖;R试验阳性。靛基质和V - P +验阴性1。凝集反应做沙门菌因子血清凝集试验，结果发现：1号菌不 能与沙门菌A - 多价（）血清发生凝集，而2 菌则产生明显的凝 集反应。运动力检查采用肉汤培养物进行悬滴标本检查。
  结果:1号菌不运动，2号菌有较好的运动力。经微生物学检查证明，1号菌为多杀性巴氏杆菌，2号菌为沙门 菌。两菌均具有较强的毒力。综合检验的结果，骡群的疫情，确诊为多杀性巴氏杆菌和沙 门菌混合感染症。1号马的肝、心、脑、。肺和2号马的脑分离的 5株“大菌落”，具有以下主要特征:均呈灰白色菌落，直径为2〜3毫米，并散发臭味，1号马各菌株菌落粗糙，2号马各菌株菌落光滑、圆 整;各菌株涂片镜检，均为革兰阴性短杆菌。
  8大菌落生化反应各菌株均能发酵葡萄糖、乳糖、果糖、木糖、麦芽糖、蕈糖和山梨醇，不发酵蔗糖、鼠李糖、肌醇和甜醇;对石蕊牛 乳产酸，靛基质和R试验均为阳性;枸橼酸盐试验阴性，V - P试验阴性。大菌落动物试验以各菌株的马丁肉汤培养液0。 5毫升，分 别皮下注射体重健康小鼠2只，均不致死;又以0。
  
   6毫升菌液，分别腹腔注射体重健康小鼠2只，均于24小时内死亡，并从死亡的小鼠心血中分离到相同的短杆菌。大菌落血清型鉴定综合诸多特性，“大菌落”符合大肠 杆菌主要特性。经用大肠埃希菌“O”抗原的诊断血清检测结果，1号 马脑、心、肝和肺菌株均为0，2号马脑菌株为09。