HE染色过程中有哪些常见问题？

染色后切片有黑色杂质，气泡

1.杂质多为苏木素染色液中的金属膜粘附于载玻片上，每天染色前仔细过滤苏木素染液或者使用半氧化苏木素染色液

2.染色后切片经过梯度乙醇脱水不彻底，导致封片后载玻片上残留水分，也可能是封片是出现的气泡

染色后切片不清晰，雾化，斑点

1.烤片温度过低，时间不够，导致脱蜡不彻底，切片留存白色斑点，

2.染色后切片脱水时间不合理，切片上残留水分，使切片雾化，需要优化脱水的梯度乙醇时间，切片经过低浓度时时间要短，向高浓度逐渐延长脱水时间

着色过深或者过浅
染色时间控制不佳，HE染色需要通过镜检来控制时间，可以先通过预实验得到比较好染色时间，一般情况下新鲜苏木素染色时间在1-3min左右，分化时间同样不易过长，过度分化可以水洗后重新复染苏木素。