全部答案

2016-12-06 22:41:32

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  奶山羊胚胎移植包括供体、受体的准备，同期发情处理，供体 的超数排卵处理、配种、胚胎收集、胚胎检查、胚胎移植等。
  (1)   供体和受体的准备供体选择符合育种目标的优良奶山 羊。无论在体型外貌、产羔、产奶性能都应该是最优秀者。同时应 具备正常的良好繁殖机能。
    经产母羊应在产羔后生殖器官恢复正常以后，同时要求无空怀、流产史。
  受体可选择普通奶山羊，其他体形较大的山羊也可以当做受 体。受体数量应是供体的15~20倍。受体应该是健康、中等膘以上，无繁殖器官疾病，发情正常的，经产空怀母羊。
  供体羊和受体羊应该在胚胎移植前2个月完成组群，进行精
   
  心的饲养管理，给予优质饲草饲料，满足其营养需要。
    保持充足清 洁的饮水。保证中等膘以上，过肥过瘦都不利。
  (2)   同期发情处理在奶山羊最佳繁殖季节进行胚胎移植。 按移植计划确定时间，把供体、受体同时进行同期发情处理。处理 方法，发情情况等进行详细记录。
  (3)   超数排卵处理根据奶山羊的发情周期，对供体进行超数 排卵处理。
    
  (4)   配种供体经超排处理，并出现发情后，选择优秀种公羊 配种。配种时,如果种公羊数量允许，可采用本交。据有关报道，本交受精率高于人工授精。也可以采用人工授精的配种方法。配 种时间应在超排处理完毕后，每天早晚对供体用试情公羊试情，当 供体母羊发情旺盛时,每天早晚各配种一次，间隔10 h，直至发情 结束。
    
  (5)   胚胎的收集奶山羊胚胎的收集采取手术的方法。
  ①手术前的准备：
  第一，手术室的准备。进行手术收集胚胎和胚胎移植，必须准 备专门的手术室。一般为内外两部分隔离，有门相通。外边为手 术间，内为检胚室。手术室要求清洁明亮、光线充足，水泥或者陶瓷砖地面，要有合理的照明，易于消毒。
    
  第二，手术器械准备。准备手术台，一般外科器械及必须的药 品。手术室安装紫外线灯，便于手术室消毒。
  手术台为一钢筋架。上边为一半圆凹形槽，使羊仰卧其中便 于手术。头低尾高，制成高低、长短可调节式，便于使用。手术前 将所有器械分类消毒。
  第三，检胚室的准备。
    应有稳定的工作台，准备体视显微镜, 以及集卵器、冲胚液、保存液等。
  第四，冲胚液和保存液的准备。冲胚液、保存液可以购买现成 的商品液使用，也可以自己配制。
  保存液的配制方法是，取供体羊血清2 mL，加人冲胚液 8 mL，用0。22 frni过滤器过滤灭菌后即可。
    供体羊血清的制作方 法是，先从颈静脉采血，于3 500 r/min,离心10 min取血清，再用 同样转速离心所得血清10 min，弃去沉淀物瓶装。用561C水浴锅 灭活30 min,再离心10 minD最后用0。 45 jum过滤器过滤灭菌, 装瓶保存于-201：以下。
    
  第五，供体羊、受体羊的准备。供体羊，受体羊手术前停食 24~48 h，适量饮水，以减低腹压。手术前置于手术台进行保定。
  第六，手术者的准备。手术者应剪短磨平指甲，洗净消毒手及 指甲缝，穿上手术工作服，戴上工作帽、口罩。
  ② 手术时间的确定:根据收集胚胎的方法，确定手术时间。
    若 用输卵管法则在发情配种结束后2〜3 d。若用子宫法则在发情配 种结束后4~7 d进行。
  ③ 手术操作:将供体羊仰卧保定于手术台上。手术部位选在 乳房前腹中线一侧2〜3 cm处。将术部剃光被毛，用肥皂水洗净、
  擦干，用2% ~5%碘酊消毒。
    用70%酒精棉脱碘。然后盖上创布，使预定的创口暴露于创布开口中部。术者应避开血管，与腹中 线平行，切一 5 cm左右的纵向切口。先切开皮肤，钝性分离肌肉，以手术刀柄捅破腹膜。然后以食指伸人腹腔中取出一侧子宫、输 卵管。冲胚后，取出另一侧,还纳前一侧后，再冲胚。
    冲胚结束后，止血，以生理盐水冲洗输卵管伞及腹腔，清除血块。腹腔内注人青 霉素80万IU，闭合腹腔，依次缝合腹膜、肌肉、皮肤。手术时，严格按照外科手术操作规程进行组织分离、止血、缝合。操作要细 心、谨慎、认真。
  ④ 收集胚胎:收集胚胎分两种方法。
    即输卵管法、子宫法。
  输卵管法将6。5~7号头皮针去掉针头，利用后面的细管。 拨开输卵管伞，将细管缓缓由伞部插人输卵
  管4〜5 cm,用夹子固 定。另一
  端接集胚皿。由一'助手平稳固定。用20 mL或30 mL的 注射器，吸取37 C冲胚液5〜10 mL,在子宫角靠近输卵管的宫管 结合部，将6号头皮针针头磨去锐尖，用针头朝输卵管方向刺人。
     操作人员同时在针头后方捏紧子宫角。助手把注射器接上，然后 推注射器，注入10 mL冲胚液,冲胚液由宫管结合部流人输卵管， 将胚胎经输卵管冲入集胚皿，可冲洗两次。再以同样方法冲洗另一侧。也可反方向冲洗。
  子宫法将子宫暴露创口表面后，用止血钳在子宫角基部钝 性刺一小孔，将二路冲胚管从孔中插入，从冲胚管气孔中用注射器 注人空气2~4mL,另一孔端靠近集胚皿。
    用头皮针从宫管接合 部朝子宫角方向刺人，将盛有冲胚液的注射器与头皮针连接后缓 缓注人冲胚液10~20mL。带有胚胎的冲胚液由冲胚管流人集胚 皿，冲洗两次。用同样方法,冲洗另一侧子宫角。
  (6)   胚胎检查将带有由输卵管或子宫内收集的冲胚液的集 胚皿置于371C环境的体视显微镜下，10倍放大，寻找胚胎。
    用吸 胚胎吸管将胚胎慢慢吸人管中移至盛有保存液的集胚皿中。将一 只供体羊的所有胚胎移至一个集胚皿中。要细心寻找，将所有胚
  胎移至保存液中，不要遗漏。室温应保持在20~251C进行检胚。
  胚胎鉴定用20〜40倍的显微镜。凡是卵子的卵黄未形成分 裂球及细胞团的,均为未受精卵。
    正常发育的胚胎，若为配种后2 d收集的为2~8个细胞，5~6 d收集的为桑葚胚，细胞结构致密。 7~8d收集的为囊胚,见细胞团内有发亮的胚胎腔。若不符合以 上条件，或者外形不规则、有空泡等,为非正常胚胎，不能使用。
  (7)   胚胎移植受体羊应与供体羊进行同期发情处理。
    选择 发情期与供体羊发情期最接近的受体羊进行移植。胚胎移植采用 手术的方法。移植应在收集完胚胎后立即进行。受体羊手术前的准备、手术保定等与供体羊相同。切开腹腔、取出子宫、卵巢、输卵 管等与供体羊取胚手术相同。将卵巢、子宫引导至切口外时，仔细 观察卵巢排卵和黄体发育情况。
    当确认已经排卵、黄体发育正常后，在同侧移人胚胎。移人部位有两个。若从输卵管冲胚，则移人 输卵管，若子宫冲胚则移入子宫角。吸胚器为一直径200〜 300 pm的玻璃管,一端装空心橡皮小球。压迫小球，将胚胎吸入 吸胚管中。输卵管移胚，由伞部沿输卵管插人吸胚器玻璃管至壶腹部，送人胚胎。
    子宫角移胚,在输卵管与子宫角交界下部用钝性 针头刺一小孔，用吸胚器送人胚胎。移植结束后，将子宫输卵管回纳腹腔，恢复原位，按供体闭合腹腔的方法，闭合腹腔，结束手术。
  (8)   术后护理供体羊、受体羊术后注射青霉素80万IU,链 霉素100万IU。
    受体羊注射孕酮10~30 mg。饲养在清洁、干燥 的圈舍内。给予营养丰富的优质饲草饲料，冬季寒冷应给予温水。 每天2次注射青霉素80万IU、链霉素100万IU,连用3天。

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  王***

  2016-12-06 22:41:32

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