酶促反应的影响因素1.酶浓度当底物浓度远远大于酶浓度时,酶促反应速率与酶的浓度成正比。在病理情况下,样品酶浓度过高后可过早且过多地消耗底物而影响酶活性的测定。
2.底物的种类和浓度对于可作用多种底物专一性不强的酶或催化可逆反应的酶来说,须根据需要选择合适的底物。根据米-曼氏方程底物浓度一般选择为Km的10倍~20倍。
3.缓冲液的种类、离子强度和pH根据对酶活性影响不同可将缓冲液分为活性、抑制、惰性三类。在最适pH条件下,酶和底物处于最佳结合和催化状态才能使酶促反应速率达到最大,测定灵敏度最高。
4.温度温度升高可加速酶促反应同时也可导致酶失活。
5.激活剂与抑制剂某些金属离子可使酶活性增加,而某些金属螯合剂抑制酶的活性。
6.指示酶及辅酶。