以下疾病需要与破伤风进行鉴别诊断：低钙血症:血清钙降低可以导致手足搐搦。进行实验室检查可以明确诊断。口腔感染或脓肿：口腔内部或周围的感染或者脓肿（例如扁桃体周围或者是牙周脓肿）可以引起牙关紧闭以及张口困难。体格检查通常可以发现局限性的肿块以及紧张。吩噻嗪药物反应:吩噻嗪药物引起的张力障碍性反应可以引起肌肉强直或者斜颈。病史询问通常可以发现患者最近有用药史;静脉应用苯海拉明通常可以减轻该症状的出现。黑蜘蛛咬伤:在一开始即会出现疼痛以及肌肉的痉挛。仔细的体格检查可以发现蝴蛛咬伤的痕迹。静脉应用钙制剂通常可以减轻症状。狂犬病:狂犬病累及呼吸肌和吞咽肌而不出现牙关紧闭。随着疾病的进展，患者会出现神志的改变以及体温升高。士的宁中毒：出现肌肉痉挛（通常累及上肢远端）以及角弓反张;但是在后期才会出现面部肌肉的受累。病史询问发现患者有自杀倾向或者是他杀可能对诊断有帮助。过度通气:体格检查发现腕足肌肉痉挛。动脉血气检查提示呼吸性械中毒。
