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为什么肾活检组织诊断需要光镜、电镜和免 疫组化三种技术并用?
经皮肾穿刺活体组织检查目前主要应用于诊断各种肾小球疾 病或病变、肾小管病变、'肾间质炎和肾移植排斥,其中肾小球疾 病或病变占绝大多数。由于肾小球结构精细而又复杂,又因为大 多数的肾小球炎和部分肾间质炎属变态反应性炎,所以在光镜观 察的基础上,还必须作超薄切片电镜观察和免疫组化检查,才可 能得到准确的病理诊断,尤其是对肾小球疾病的诊断,这三种技 术是缺一^不可的。 (1) 光学显微镜检查:光镜...
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经皮肾穿刺活体组织检查目前主要应用于诊断各种肾小球疾 病或病变、肾小管病变、'肾间质炎和肾移植排斥,其中肾小球疾 病或病变占绝大多数。由于肾小球结构精细而又复杂,又因为大 多数的肾小球炎和部分肾间质炎属变态反应性炎,所以在光镜观 察的基础上,还必须作超薄切片电镜观察和免疫组化检查,才可 能得到准确的病理诊断,尤其是对肾小球疾病的诊断,这三种技 术是缺一^不可的。 (1) 光学显微镜检查:光镜检查是病理诊断的基础,对大多 数肾疾病可以作出诊断或初步诊断。因肾小球的主要结构是毛细 血管球,石蜡切片厚度应在4^以下,过厚可造成细胞数目增 多或毛细血管基底膜增厚的假象。除HE染色外,还需作以下三 种特殊染色:①PAS (过碘酸-Schiff)染色能显示所有的基膜成 分,包括肾小球毛细血管、肾小球囊、肾小管和间质血管壁的基 膜以及肾小球系膜基质,染成深红色;②PASM (过碘酸六胺银) 染色将基膜成分和网状纤维染成黑色,由于与背景反差明显,对 肾小球毛细血管壁增厚、系膜基质增多及硬化、肾小球基底膜的 断裂、皱缩、双轨化、钉突形成、肾细小动脉硬化以及肾小管萎 缩等病变显示非常清晰,是诊断肾小球病变必不可少的一种染 色;③Masson三色染色法显示免疫复合物、血栓和纤维素样坏 死、蛋白质等物质为红色,基膜和胶原纤维呈蓝绿色。此外,可 按需要作其他特染。疑有淀粉样变时用刚果红染色法来鉴定淀粉 样蛋白,后者可被染成桔黄至桔红色;再在偏光显微镜下观察, 淀粉样蛋白沉积处呈绿色双折光,更为清晰可见。疑有血栓形成 或纤维素样坏死时可作纤维素染色。 (2) 免疫组化检查:肾活检组织通常用恒温冷冻切片的直接 免疫荧光法,也可用免疫酶标法。选择在肾脏疾病中常易出现的 免疫球蛋白(IgG、IgM、IgA)、补体(C3、C4、Clq)和纤维蛋 白等为免疫组化常规检查对象;还可根据疾病需要添加其他检测 指标,如对于疑为乙肝病毒相关性肾炎的病例,可增加HbsAg、 HbeAg和HbcAg等病毒抗原的免疫荧光检测。在荧光显微镜下观 察,可以了解免疫复合物的有无、分布和数量等。 (3) 透射电镜检查:最常用于观察肾小球的超微结构变化, 如毛细血管基膜的病变、致密沉积物的有无及分布,足突的变化 等。对某些肾脏疾病,如微小病变型肾小球病、薄基膜肾病、遗 传性肾炎(Alport综合征)的早期阶段等,超薄切片电镜检查是 确定诊断的惟一方法。对于淀粉样变性肾病、糖尿病性肾小球硬 化、狼疮性肾炎、早期膜性肾病等有一定超微结构病理特点的疾 病,电镜也是重要的诊断工具。