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酵母RNA提取相关问题

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酵母RNA提取相关问题

实验过程:1.干酵母片研碎,10%Nacl沸水浴浸提30min
2.冰盐浴冷却,离心取上清夜
3.等电点沉淀
4.乙醇洗涤,离心,重复3次
5.干燥,称重
6.匀浆,稀释定容,调ph至7.0,实验管加水,对照管加沉淀剂,冰浴20min,离心,取上清夜.紫外测定OD260
沉淀剂是:钼酸铵-过氯酸

问题:(尽量联系工业生产)
1.为什么选用浓盐法提取?有什么好处
2.为什么用等电点沉淀作为主要纯化步骤?
3.DNA的去除方法是怎么考虑的?
4.紫外测定为什么要固定PH,否则会怎样?
5.最后一步离心后上清液稀释了100倍,为什么要这样?

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好评回答
  • 2012-04-12 18:13:17
    1,浓盐是为了防止RNA溶解于水中。
    2,掌握好等电点,RNA的纯化效果,纯化浓度最好
    3,抽提离心步骤去除了DNA
    4,RNA溶解液是有一定PH值,需要前后恒定,否则RNA容易沉淀,导致溶解不均,测不准确。
    5,为了节省RNA。

    小***

    2012-04-12 18:13:17

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