如果用手提式髙压灭菌锅灭菌，操作步骤如下： 一是高压 锅内加水至标记高度，不可过多与过少； 二是上锅盖时，关好 排气阀； 三是试管应竖放于锅内；四是锅内压强上升到50千 帕时，放开排气阀，排尽锅内冷气，至压强为“〇”时再关紧排气 阀，等压强升至108千帕时保持30〜45分钟，才能灭菌彻底； 五是压强避免过大，过大时应调小火力；六是让蒸气慢慢排 出，太快时气压下降过快易致试管破裂，而缓慢排气则可以烘干棉花塞，以防止湿的棉花塞污染杂菌。 压力锅内蒸气压力与温度关系表、压力锅内冷空气排除 程度与温度关系表。
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