PCR扩增后DNA浓度有变化吗?
PCR扩增后DNA浓度有变化吗?
如果你做的是非常靠谱的绝对定量RT-PCR,可以根据标曲算。 但实际上对包括RT-PCR在内的PCR产物浓度定量,更简单、更靠谱的办法是: 1,加标准marker电泳,用照胶自动分析系统计算,可以大致定量,得其质量浓度; 2,更准的是,回收PCR产物,用紫外分光光度计准确测定其质量浓度。 “先算出模板链的质量然后用2的N-1次方算出扩增后DNA的数量相乘”,这是有误区的,实际的PCR反应不是理想的指数扩增过程,尤其是循环到了一定次数后。何况,还要考虑特异性的问题。 如有疑问,欢迎继续讨论,纯属手打,欢迎采纳,祝愉快!
答:●PCR扩增产物长度:引物的产物大小不要太大,一般在80-250bp之间都可;80~150bp最为合适(可以延长至300bp)详情>>