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血清幽门螺杆菌抗体检测方法有哪些?

血清幽门螺杆菌抗体检测方法有哪些?
z*** | 2016-11-28 16:56:30

全部答案(共1个回答)

    2016-11-28 17:43:30
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    具体如下(1)   菌体抗体的检测:补体结合试验、细菌凝集试验、被动血凝试验等方法由于敏感性、特异性、可靠性较差,目前已很少采用。间接免疫荧光法简单、快速、敏感性和特异性高,可以弥补培养法由于幽门螺杆菌弱、培养过程污染或培养基等因素所致培养阴性不足。但由于需荧光显微镜,其应用受到限制。免疫印迹法是取数株幽门螺杆菌整菌溶解物经SDS - PAGE电泳所得蛋白转移至硝酸纤维薄膜,取受检血清2mL与...

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    具体如下(1)   菌体抗体的检测:补体结合试验、细菌凝集试验、被动血凝试验等方法由于敏感性、特异性、可靠性较差,目前已很少采用。间接免疫荧光法简单、快速、敏感性和特异性高,可以弥补培养法由于幽门螺杆菌弱、培养过程污染或培养基等因素所致培养阴性不足。但由于需荧光显微镜,其应用受到限制。免疫印迹法是取数株幽门螺杆菌整菌溶解物经SDS - PAGE电泳所得蛋白转移至硝酸纤维薄膜,取受检血清2mL与薄膜在摇动下室温过夜,洗涤后再分别以碱性鱗酸酶标记的兔抗人IgG、IgA和IgM检出与血清中抗体结合的区带。研究认为,应用此法检查血清IgG和IgA抗体可以肯定诊断感染。适合不能做内镜者诊断幽门螺杆菌感染和易感人群的筛选。但该法操作烦琐,所显示的区带常常不恒定和不特异,给结果判断带来困难。酶联免疫吸附试验是目前临床应用最多的方法,其敏感性高、特异性强、稳定性好,可检测不同类型的抗体。Perez等用超声粉碎物作抗原,结果抗幽门螺杆菌-IgG、IgA抗体特异性94. 4%,敏感性93.
    1%,而IgM则无特异性。目前国内外均已有抗幽门螺杆菌抗体试剂盒供应。
    
    (2) 尿素酶抗体的检测:由于幽门螺杆菌富含尿素酶,故以尿素酶为抗原采用ELISA检测患者血清中特异性尿素酶抗体。国外Karnes报道其特异性为100%,敏感性93%。
    
    (3) N-乙酰神经氨结合凝集素(NLBH)抗体的检测: Evans等从无症状者和分离出的幽门螺杆菌8826株中提纯NLBH,经证实无尿素酶活性,以此为抗原,行ELISA检测了 187例血清,结果发现特异性88. 3%,敏感性75% ,消化性溃疡者81. 5%可检出NLBH抗体。
    
    (4) 单克隆抗体的应用:Sugiyama等发现三株特异性很高的幽门螺杆菌单抗,其中单抗幽门螺杆菌(CP3)特异性识别幽门螺杆菌抗原25kd,以单抗CP3纯化的25kd蛋白为抗原应用ELISA检测幽门螺杆菌感染的患者血清,结果特异性100%,敏感性96.9%,且慢性胃炎、胃溃疡和十二指肠溃疡患者CP3抗体滴度明显升高,〇匕滴度与胃炎组织分级显著相关,故认为检测CP3抗体可作为胃炎分级的指标。
    
    (5) 细胞毒素相关蛋白A
    (CagA):由于人群中幽门螺杆菌的感染率在50%以上,其中约50%的幽门螺杆菌含有细胞毒素相关蛋白基因A,可产生细胞毒素相关蛋白A的幽门螺杆菌菌株的感染与消化性溃疡的发生有较高的相关性,有些学者甚至认为抗CagA阳性可作为消化性溃疡的一项参考指标。在胃癌中CagA 阳性幽门螺杆菌的感染率也很高,多数报道在95%以上。发展快速及特异性检测CagA阳性幽门螺杆菌感染的方法具有重要意义。斑点金免疫渗滤试验是近几年来发展起的一项新的免疫检测技术,其微孔膜既能吸附蛋白质,又具有快速渗滤到毛细血管的作用。当血清标本通过微孔滤膜时,血清中的抗原或抗体不仅能与膜上的抗体或抗原结合,还能浓集于膜上而加快免疫反应,且胶体金标记物为红色,结合后即显红色斑点,不需加人其他试剂显色。该方法特异、敏感、简便、快速,一般可在2~3分钟内
    
     
    
    出结果,可单人份或多人份操作,且不需要特殊设备。适应于大面积、大样本的CagA阳性幽门螺杆菌的筛选,为CagA阳性幽门螺杆菌感染的诊断及流行病原研究带来极大的方便。
    李*** | 2016-11-28 17:43:30 156 66 评论
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