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抗双链DNA抗体的检测方法有哪些?

抗双链DNA抗体的检测方法有哪些?
刘*** | 2018-03-24 05:03:28

全部答案(共1个回答)

    2018-03-24 12:43:20
  • 抗dsDNA抗体的检测方法很多,目前临床常规检测广泛应用的方法有:间接免疫荧光法(IIF),包括短膜虫法(CL-IIF)和马疫锥虫法(TE-IIF)两种方法;放射免疫分析法(RIA),即Farr法、酶联免疫吸附试验(ELISA法)、蛋白印迹法(WB);斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),即金标法、间接(被动)血凝试验(PHA)等。国外临床常规检测抗dsD­NA抗体,目前以ELISA、CL-IIF法为...

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    抗dsDNA抗体的检测方法很多,目前临床常规检测广泛应用的方法有:间接免疫荧光法(IIF),包括短膜虫法(CL-IIF)和马疫锥虫法(TE-IIF)两种方法;放射免疫分析法(RIA),即Farr法、酶联免疫吸附试验(ELISA法)、蛋白印迹法(WB);斑点金免疫渗滤试验(DIGFA),即金标法、间接(被动)血凝试验(PHA)等。国外临床常规检测抗dsD­NA抗体,目前以ELISA、CL-IIF法为主,国内则以IIF (CL-IIF及TE-IIF)、Farr法、金标法为主。上述各种检测抗dsDNA抗体方法,市场上均有商品试剂盒供应。欧美国家临床常规检测抗dsDNA抗体,现一般采用ELISA法、IIF法。抗dsDNA抗体的检测对于SLE的诊断和治疗极为重要,目前市场已有多种商品检测试剂盒,但不同的检测方法检测抗dsDNA抗体敏感性、特异性略有差异,临床应用各有利弊,临床应用时应对检测结果正确分析。一般来讲,检测抗dsDNA抗体,ELISA (EIA)、RIA 敏感性大于CL-IIF、TE-IIF; CL-IIF、TE-IIF特异性大于ELISA (EIA)、RIA。以上原因除决定于检测方法的敏感性、特异性外,还受以下因素影响:①dsDNA抗原的特异性、稳定性:ELISA、Fair法、金标法中使用的人工纯化抗原,其纯度(抗原特异性)可直接影响检测结果,如果含有ssDNA、组蛋白等其他核抗原成分,将引起假阳性结果。而抗ssDNA抗体、抗组蛋白抗体缺乏疾病特异性,可见于多种风湿性疾病,进而影响检测方法的特异性。dsDNA抗原在纯化包被(预包被)等生化处理过程中,易造成部分DNA内部位点人为暴露,变性解链,变成ssDNA。抗原稳定性问题可影响检测结果特异性。文献报告,Farr法检测试剂盒中,抗原125I -dsDNA中,如含1% ssDNA,引起的假阳性结果就可达6%。CL-IIF、TE-IIF法中,应用的dsDNA抗原为天然纯dsDNA,未经人工处理,抗原性纯一、特异; ②高亲和力与低亲和力抗dsDNA抗体:抗dsDNA抗体存在高亲和力(highavidity)与低亲和力(lowavidity)两种特异性的抗体。所谓亲和力是描述多价抗体和能与之结合的有多个决定簇的抗原间形成的复合物稳定性术语。高亲和力抗dsDNA抗体,对SLE有较高特异性。低亲和力抗dsDNA抗体除存在于SLE外,也存在于其他风湿性疾病中,对SLE诊断价值低。各种检测方法对两种亲和力的抗ds-DNA抗体检测的适用性不同,低亲和力抗ds-DNA抗体适用于ELISA法检测,高亲和力抗ds-DNA抗体适用于Farr法检测。专家建议,抗dsDNA 抗体检测除应用ELISA或IIF法外,还应利用Fair法检测,则会更有益处。
    全*** | 2018-03-24 12:43:20 67 16 评论
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