接种室（箱）消毒灭菌1。紫外线照射在每次接种前，应将所需器具一起移人接种室（箱）内，然后打开紫外线灯进行灭菌。如果接种室体积较大，开灯照射达2小时才能达到灭菌效果；如果接种箱体积较小，只需开灯半小时左右即可达到灭菌效果。使用时应该注意，当细菌接受致死量紫外线照射后，随即给予可见光照射，其中有一部分细菌又可能复活，称光复活现象。
  其机制是：自然光能使微生物光激酶作用，使胸腺嘧啶二聚体重新分解为单体，随之DNA又能复制。因此，经紫外线消毒后的空间，不要立即启用日光灯，如果是白天进行灭菌，接种室应挂上黑窗帘，接种箱罩黑布，遮光半小时，防止光复活作用，以提高杀菌效果。照射时要注意防护对眼睛的灼伤，因此工作人员要离开室内，以防辐射影响身体健康。
  2。福尔马林熏蒸对使用时间长、污染程度严重的接种室(箱），经清扫洗刷干净后，必须再用福尔马林、高锰酸钾混合进行彻底熏蒸消毒灭菌。具体操作方法：按每立方米空间用福尔马林原液10毫升，高锰酸钾7克计算用量。先密闭门窗，按接种室体积将高锰酸钾先置于玻璃、陶质或金属容器中，然后倒人相应的福尔马林，按房间大小分设几个点，药剂放完后，随即离开接种室，关闭门窗，熏蒸12小时以上。
  也可用酒精灯直接加热装有福尔马林原液的容器，使其蒸发进行熏蒸。无论用哪一种方法熏蒸，都应隔天才能人室接种。接种前先喷氨水或碳酸铵，用量为每立方米空间喷25%-28%的氨水38毫升或碳酸铵5克，驱除室内残气，原理是氨与福尔马林残气结合产生白色无臭的阿托品。
  如接种箱体积小，也可用纱布浸溶液进行擦拭，或用喷雾器对箱内的上下左右喷雾，喷后30分钟，箱内杂菌及尘埃随雾滴落到箱底，从而达到消毒灭菌目的。3。石炭酸喷雾在进人接种室工作前，要先用2%石炭酸水溶液（或2%-3%煤酚皂液）浸湿的揩布，将门窗、桌、発及地面擦拭一遍，再用3%石炭酸水溶液进行喷雾，促使空气中的微粒和杂菌附着沉降，防止桌面和地面上的微尘飞扬，同时也起杀菌作用。
  4。硫黄熏蒸用药前把发菌室、出菇棚墙壁和地面用喷雾器喷湿，于夜间将硫黄粉放在金属燃烧盘内，并将室内的灯头及带金属的设备用塑料薄膜包扎严密防腐蚀。根据房间大小设投药点，每立方米空间用硫黄粉15-20克，在燃烧盘内先放几张纸助燃，再倒人硫黄粉。因燃烧产生的二氧化硫相对密度大，故燃烧盘宜置较高处，以利气体均匀扩散，在硫黄粉中添加等量干木屑或1/10硝石（硝酸钠），能促使硫黄燃烧完全。
  熏蒸前地面、墙壁及空间喷雾水，可使空间二氧化硫生成亚硫酸，能提高杀菌、杀虫、杀螨效果。二氧化硫及其再生物有毒，熏蒸后工作人员要注意对眼睛、呼吸道进行防护。过氧乙酸熏蒸和喷雾操作方法:将过氧乙酸按3克/立方米用量，置于陶瓷、搪瓷或玻璃容器里，用火炉或酒精灯加热使其蒸发，密闭门窗1-1。
  5小时即可达到消毒灭菌效果。过氧乙酸蒸气极易扩散，亦不产生聚合物，熏蒸后开窗通风30分钟左右气味即可消失。当温度与空气相对湿度低时，处理药剂用量应相应加大。也可以采用超低容量喷雾，超低容量喷雾既起喷洒灭菌作用，又起熏蒸作用，用2%浓度的过氧乙酸，喷量为8毫升/立方米，喷后密闭30分钟，对各类型微生物杀灭菌效果可达99。
  9%。超低容量喷雾是将药液喷成15-75微米的小雾粒，这样用药省，气化效果好，灭菌效率高。使用的器械有电动手提式超低容量的喷雾器、手持式超低容量喷雾器和气雾发生器。也可将普通喷雾器的喷头片（孔径1。3-1。6毫米）换上低容量的喷雾喷头片（0。
  6-0。7毫米），进行低容量喷雾，但用药量要适当加大。使用时应注意：稀释液应新鲜配制，配制时要用清洁水，因金属离子与还原性物质可加速药物的分解。本品性不稳定，原液应加盖贮存于通风阴凉处，配成稀释药液，装在有盖的塑料桶里，常温15℃-25°C下保存，不宜超过2天，40°C时不宜超过10天。
  使用高浓度药液时，谨防溅到眼内、皮肤、衣服上，不慎溅及，要立即用水冲洗。如购不到过氧乙酸成品，也可自行合成。具体的合成方法:取冰醋酸（乙酸)140毫升，加浓硫酸7。1毫升，混合均匀，再加入30%过氧化氢70毫升，搅拌或置振荡器上振荡4小时，在室温下静置过夜，即配成16%-20%的过氧乙酸溶液。
  如果无振荡设备，混合均匀后于室温下静置3天，亦可形成上述浓度的过氧乙酸溶液。如果保存时间较长，可再加入0。3%-(X5%磷酸或焦磷酸钠做稳定剂。6。漂白粉喷洒接种室的工作台、窗台、接种工具、接种箱和培养室的培养架等，可用漂白粉上清液擦抹消毒，墙壁、空间可用喷雾器喷洒漂白粉上清液消毒灭菌。
  常用浓度为5%,如果出现悬浊液，可置暗处沉淀1-2小时，再取上清液使用。取时小心倒出或吸出。喷雾用量为1-1。5毫升/立方米。由于药液稳定性差，故应临时配制，随配随用。澄清液如果一时用不完，可密闭于容器中，置暗处可短期保存。为了提高杀菌效果，在漂白粉溶液中加人半量或等量的氯化铵、硫酸铵或硝酸铵，可加强其杀菌作用。
  这种溶液称漂白粉活性溶液。如在4%漂白粉上清液（含1%有效氯）中加入0。25%-4%硫酸铵，可加速杀灭细菌芽孢（由2小时缩短为2分钟）。活性溶液的效力在最初几分钟内最强，所以配成后应在1-2小时内用完，否则效果大为降低。当空气湿度高时，可直接喷洒漂白粉消毒地面，用量为20-40克/立方米。
  室内喷雾消毒，工作人员应戴防毒面具或口罩。喷完药，随即打开门窗，经充分通风后工作人员方可人室操作。