物质被电磁波激发后，从基态（S0）跃迁到激发态（Sn），在自选多重度不变的情况下，处于激发态的物质又弛豫回到基地的过程中，如果伴有光子辐射，那么此过程中发射的光子称为荧光。
理论上只要是电磁辐射的能量与物质上下两能级的能量相等，就可以将物质激发。因此波长合适的激光当然可以作为荧光光谱仪的光源。
但是，一般荧光光谱仪的光源是氙灯，因为氙灯的光谱更宽，可以通过单色仪配合狭缝来选出一定波长的光作为激发源；相比之下，激光的单色性好，带来的缺点是可调节性能差，不太适合作为荧光光谱仪的光源（当然，其他光谱仪，不如紫外可见吸收光谱仪等也不太适应，因为需要条件波长）。除非只用单一波长来激发样品，但是实际中是不同现实的。
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