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荧光显微镜的使用方法

时间:2022-09-08 02:49:47 其他合同

荧光显微镜用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,荧光显微镜就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

它是以紫外线为光源,用以照射被检物体,使之发出荧光,然后在显微镜下观察物体的形状及其所在位置。用于研究细胞内物质的吸收、运输、化学物质的分布及定位等。细胞中有些物质,如叶绿素等,受紫外线照射后可发荧光;另有一些物质本身虽不能发荧光,但如果用荧光染料或荧光抗体染色后,经紫外线照射亦可发荧光,就是对这类物质进行定性和定量研究的工具之一。

专为荧光显微镜设计制作的聚光器是用石英玻璃或其他透紫外光的玻璃制成,分明视野聚光器和暗视野聚光器两种。还有相差荧光聚光器。

下面要为您介绍的是使用时可采用的方法:

1、采用反射激发时,先在光路中加入绿色激发滤光片组,把照明可变孔径光阑与视场光阑完全打开,调节光源位置,使照明光束通过物镜转换器的螺孔中央并使光源成象于物平面上,此时物镜螺孔应是通孔(不装物镜)。检查激发光束是否通过物镜螺孔中央,可在螺孔端面上放置半透明纸观察光源光斑是否居中,在某些显微镜中,光源是在垂直面内调节其上下左右位置,而光源成象是通过集光镜沿轴方向移动来达到的。

2、采用透射激发时,可以使用兰色光线根据普通明场照明法进行照明系统的调节,这包括光源调节及聚光镜中心的调节。如果采用暗场聚光镜,则还需要注意暗场聚光镜的使用及调节方法,当用兰色光线调节好后,就可采用更换滤色片的方法,使标本得到所需要的激发光线照射标本,但要注意使遏止滤光片已在光路中,这样可以保护观察者眼睛免受紫外线损伤。

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