爱问知识人 爱问共享资料 医院库

如何测定a-淀粉酶的酶活力?

首页

如何测定a-淀粉酶的酶活力?

如何测定a-淀粉酶的酶活力?

提交回答

全部答案

    2016-11-28 13:50:19
  •   
    1。 试剂
    (1)  原碘液。称取分析纯结晶碘llg,分析纯碘化钾22g,先用
    少量蒸馏水使碘完全溶解后,再加蒸馏水定容至500mL,贮存于棕 色瓶内。
    (2)  稀碘液。取原碘液2mL,加碘化钾20g,加蒸馏水溶解定容
    至500mL,贮于棕色瓶内。
       (3) 2%可溶性淀粉。称取200g可溶性淀粉,用少量蒸馏水调 勻,徐徐倾入煮沸的蒸馏水中。加热煮沸至透明为止,冷却定容至 lOOmL。此溶液需当天配制。 (4) 0。02mol/LNa2HP04。12H20—柠檬酸缓冲溶液(pH = 6。
      0)。称取磷酸氢二钠(Na2HP04 。 12H20) 45。23g和柠檬酸 (C6H807 *H20) 8。07g,用蒸馏水溶解并定容至lOOmL,配好后应 以酸度计校正pH为6。0。 (5) 标准终点色溶液。 A液:称取分析纯氯化钴(C0Cl2 。
       6H20) 40。2139g和分析纯 重铬酸钾0。 4878g,以蒸馏水溶解定容至500mL。 B液:称取铬黑T (C^HuNsNaOzS) 40g,以蒸馏水溶解定容 至 500mL。 使用时,取A液40mL与B液5。0mL混合,此混合液宜置于冰 箱保存。
      使用15d后需要重新配制。 2。 测定程序 (1) 待测酶液的制备。称取酶粉1。000〜2。000g或l。OOmL酶 液,用少量40°C,0。02mol/LNa2HPO4 。12^0—柠檬酸缓冲溶液 (PH=6。0)溶解,并用玻璃棒搅拌。
      将上层清液小心倒人适当的容 量瓶中,沉渣部分再加入少量上述缓冲溶液。如此反复搅拌3〜4次。 最后,将全部酶液移人容量瓶中,用缓冲液定容至刻度摇勻,通过4 层纱布过滤;再用滤纸滤清,滤液供测定用。 (2) 测定。取2mL标准终点色溶液于白瓷板空穴内,作为比较 颜色的标准。
      取2%可溶性淀粉20mL和pH = 6。0的Na2HP04 。 12H20—梓檬酸缓冲液5mL于招5X200试管中,在60°C恒温水浴中 预热4〜5min;然后,加入预先稀释好的酶液0。5mL,立即记录时 间,充分摇勻,定时用吸管取出反应液0。
      
      5mL,滴于预先充满比色稀碘液(约1。5mL)的白瓷板空穴内。当穴内的颜色反应由紫色逐渐变 为红棕色,与标准终点色相同时,即为反应终点,并记录时间(min)。 注意事项:酶反应的全部时间应控制在2〜2。 5min之内;测定 时,照明采用40W日光灯,灯与瓷板的间距以60cm左右为宜;白 瓷板可用l0mL比色管代替。

    朱弄潮

    2016-11-28 13:50:19

类似问题

换一换

相关推荐

正在加载...

热点检索

  • 1-20
  • 21-40
  • 41-60
  • 61-80
  • 81-100
  • 101-120
  • 121-140
  • 141-160
  • 161-180
  • 181-200
返回
顶部
帮助 意见
反馈
关注
爱问

关注爱问微信公众号,开启知识之旅,随时随地了解最新资讯。

确定举报此问题

举报原因(必选):