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EST序列要到NCBI上去查询,把序列确定下来后就可以用软件设计了 用引物扩增获得的cDNA序列只是这个基因的一部分,而不是全场,要获得全长,目前常用RACE技术
1个回答
我觉得 应该是序列的 这个要切记。
具体如下:①编码结核杆菌抗原的基因序列;核杆菌基因组重复序列;③人型轩菌 特异序列;枝杆菌dnaj基因⑤rRNA序列。
对所找到的序列进行多序列比对将搜索到的同一基因的不同氨基酸序列进行多序列比对,可选工具有Clustal ... 三、确定合适的保守区域设计简并引物至少需要上下游各有一个保守区域,且两个保守区域相距50
应用蛋白质序列设计的引物克隆DNA有内含子(如果对你有用,请给“好评”谢谢(^@。@^))
genebank没上过? EMBL/Genbank/Swissport和TREMBL这几个库都查过了没用的话,就很难查了
这个为了方便后者的观察
根据GenBank中登录的SARS-CoVM蛋白基因序列设计引物,采用反转录聚合酶链反应方法从感染SARS病毒的VeroE6细胞中扩增得到约666bp的片段,构建重组真核表达质粒PVAX1/M。体外转染COS-7细胞,细胞免疫化学方法鉴定目的蛋白的表达后,肌肉注射免疫Balb/c小鼠(雌性,6周龄)...
根据mRNA(真核的)设计的引物,一般如果用DNA做模板的话,那么会出现的情况会是以下几种。一是能扩增出条带,但目标条带比你要的条带要大,因为你会连同内含子一同扩增出来,所以片段会偏大。二是什么都扩增不出来,这种情况一般是两种原因,1个是内含子片段太大,taq聚合酶没有延伸完,这种情况是很常见的,真...
引物: 引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。 但在设计引物时还应该遵循以下原则: ①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。 ...
引物设计是否合理可用PCRDESN软件和美国PRIMER软件进行计算机检索来核定
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性
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