为何抗核抗体筛选试验主要应用以HEp？

自1957年Holbomw首先应用IIF法检测ANA以来，许多研究者对ANA检测方法进行了大量研究，但事实证明，只在IIF法改良上有些进展，如底物选择及其制备方法改良等，其他如试图将ELISA推广为最基本的筛选方法来检测ANA并未获成功。原因如下：ANA是指细胞内所有具有抗原特性总的抗核抗体，人工方法复制细胞抗原所有成分极其困难，细胞内靶抗原的抗原性还同抗原存在的相对浓度、自然抗原决定簇的二级及高...

自1957年Holbomw首先应用IIF法检测ANA以来，许多研究者对ANA检测方法进行了大量研究，但事实证明，只在IIF法改良上有些进展，如底物选择及其制备方法改良等，其他如试图将ELISA推广为最基本的筛选方法来检测ANA并未获成功。原因如下：ANA是指细胞内所有具有抗原特性总的抗核抗体，人工方法复制细胞抗原所有成分极其困难，细胞内靶抗原的抗原性还同抗原存在的相对浓度、自然抗原决定簇的二级及高级结构有关，即便应用现代分子生物学技术重组出的某些抗原因不具备天然构象而无抗原性或抗原性很弱；由于检测水平及患者经济承担能力的限制，有许多特异性抗体还不能作为常规检测项目，荧光染色模型可初步判断相应抗体性质范围或确定抗体特异性。目前国际上通常采用HEP-2细胞（人喉癌上皮细胞）作为ANA的检测底物。目前检测ANA商品试剂盒，多数选择HEP-2细胞作为抗原底物片。HEP-2细胞具有如下优点：属人来源培养细胞，核抗原丰富、特异性强、含量高；核大、细胞结构清晰，易于结果观察及荧光染色核型分析。HEP-2细胞片较鼠肝（肾）冷冻切片检测ANA阳性率可提高10%〜20%，这些抗核抗体包括抗SSA/Ro 抗体、抗着丝点抗体、抗增殖性细胞核抗原（PCNA)抗体、抗rRNP抗体、抗线粒体抗体、抗各种细胞器抗体、抗细胞骨架抗体、抗细胞周期蛋白抗体等。综上所述，IIF法（HEP-2细胞为抗原底物）检测ANA仍是检测细胞内抗原自身抗体的 “金标准”。目前，市场上除IIF法外，还有ELISA法、金标法、快速胶乳颗粒试剂条法等检测ANA商品试剂盒，以上方法均采用人工纯化的ANA核抗原，抗原范围仅为常见的几种核抗原，虽然操作简单，结果易于判断，但易出现假阴性结果，故不提倡使用上述检测ANA 的方法。